Day: 16 Desember 2018

exemple de calcul rt 2012

Bien que la détermination de la précision qPCR nécessite des données quantitatives, il y a aussi la possibilité de déterminer qualitativement la précision de la méthode. Cependant, il est parfois impossible d`obtenir un grand nombre de répétitions, pour des raisons tant financières que techniques. Par conséquent, des valeurs incorrectes pour la fluorescence d`arrière-plan inconnue peuvent affecter l`ensemble de la courbe sigmoïdale et l`identification de la phase exponentielle et par la suite déformer le résultat (14, 25 – 26). Par conséquent, les 6 réplicats avaient la même efficacité pour le calcul ultérieur, mais chaque combinaison (par exemple, la combinaison de FAM73B et une dilution 1:10) avait une efficacité différente. L`échantillon original sans aucune dilution est la référence, et une dilution de 1:10, 1:100 et 1:1000 de l`échantillon original sont les échantillons cibles. L`étude actuelle compare l`exactitude et la précision des quantités d`ADN estimées à l`aide de la méthode de 2-ΔΔCT et de la méthode de calcul corrigée de l`efficacité individuelle. En temps réel PCR (également désigné comme PCR quantitative — qPCR; l`utilisation de RT-PCR est inappropriée car cette abréviation est dédiée à la PCR de transcription inversée), la fluorescence est mesurée après chaque cycle et l`intensité du signal fluorescent reflète la quantité d`amplicons d`ADN dans l`échantillon à ce moment précis. De plus, la méthode de dilution peut être laborieuse et consommer du temps et des réactifs si elle est effectuée pour différents échantillons (15). OK, Comment trouvez-vous un? Lalit, qu`est-ce que la densité de brouillard film a à voir avec le flou géométrique? Pourtant, nous ne pouvons exclure la possibilité d`erreurs expérimentales ou de variation d`échantillon. En outre, schefe et coll. Les résultats de cette étude suggèrent que la méthode de calcul de l`efficacité individuelle corrigée fournit des estimations plus précises de l`expression du gène relatif que la méthode communément utilisée de 2-ΔΔCT.

Merci beaucoup à vous tous. Norm sont corrects. Nous n`avons pas l`intention, dans cette revue, de décrire chaque aspect de la conception, de l`optimisation et de la validation de la qPCR; Cependant, nous espérons que ce guide de base aidera à orienter les débutants et les utilisateurs de qPCR dans l`utilisation de cette technique puissante. De plus, il convient de rappeler ici que, par définition, un échantillon blanc ne devrait jamais être positif en PCR. La détermination de l`efficacité PCR par la courbe standard fournit en fait deux éléments d`information.